2012年6月11日星期一

Hi all, to celebrate the new day!

终于能在blogger上发帖子了!

2010年7月11日星期日

大企业更应该向小企业学习

成功的大企业,往往会成为有进取精神的中小企业的参观、学习对象。甚至一些已经很大的企业,还要组团前往更大的超级企业取经。

有些成功大企业不是很喜欢被参观学习,而另一些成功大企业则敞开大门,随时派专人接待"朝拜者"。

其实,大企业值得小企业学的东西不多,可是反之,小企业值得大企业学的东西不少。可惜,几乎没有一家大企业,肯"屈尊"向小企业学习。

大企业自己清楚,自身的问题太多了。企业大到一定程度,就会染上大企业病。大企业病的核心症状,国外管理学者称它为bureaucracy,我们一般翻译成"官僚主义",按照这个术语的真实含义,我倾向于把它翻译成"制度-流程主义"。

"制度-流程主义"的优势,是通过标准化,减少人为的误差。但是有一利必有一弊。"制度-流程主义"的问题表现为:第一,组织结构复杂。传统金字塔结构和现代矩阵结构,在复杂程度上,难分伯仲,其后果,就是效率低下。

第二,同级钳制。由于很多制度,是由特定部门掌握的,又由于很多流程,是跨越不同部门的,所以,一个部门往往成为另一个部门做事的"绊脚石"。这种"绊脚石",有时是必要的,有时则是有害的。

第三,制度严明,流程漫长。制度、流程的初衷,是避免主观因素的干扰,提升质量和效率。其核心是impersonal,即客观化。但是事与愿违,由于制度、流程过多,整个企业对环境变化的知觉和反应速度迟缓。

第四,人浮于事。人比事多,事情本来很快就可以做完,但是员工不愿很快做完,否则,就没事可做,如果没事可做,那岗位就成为多余。因为人比事多,所以人就成了事。与人打交道,比做事重要。正所谓"小公司做事,大公司做人"。

判断一家公司有没有"制度-流程主义",只要细心观察,很快就可以诊断。诊断"制度-流程主义",有"三看"。

第一, 看会议室。"制度-流程主义"的迹象表现为开会次数多,每次开会人数多,每次开会时间长,开会的内容在重复,开会定的计划没有执行,没有执行也没有人追究。

第二, 看文件柜。规章制度和流程多到用脑子记不住,所以,必须形成文件。由于文件特别多,即使长期从事一个岗位的工作,也记不住。所以,每次办事需要查阅。文牍主义是"制度-流程主义"的明显特征。新文牍主义因为计算机技术的应用而有了新的生命。有趣的是,电脑比人更忠实于制度和流程。例如,因为系统设计的失误,有时即使不相关,也必须编造一个内容输入电脑,否则,整个流程就会中断。

第三, 看决策速度。两个月前,我推荐一位优秀人才给三家企业,三家企业都表示急需这样的人才,但是反应速度完全不同。第一家企业收了简历,直到如今还在走流程。第二家企业,立即见面,表示强烈的用人意向。但是用人单位的领导必须向上级请示。直到如今还在等待批示。第三家企业第二天就见面,一周内就决定用人。如今,这个人才已经报到了。决策慢是"制度-流程主义"的特征。

Bureaucracy的反义词是adhocracy,我们姑且称之为"灵活型企业"。管理学大师明茨伯格(Henry Mintzberg)推崇这个词所代表的管理理念。他认为,"制度-流程主义"已经out了,而"灵活型企业"代表未来管理的趋势。"灵活型企业"善于解决问题,善于创新,更容易在多变的环境中生存。

现实中的"灵活型企业",以房地产开发商和管理咨询公司为代表,这些企业,采用基于项目的组织模式(project-based management)。一些巨型的制造企业,也推行项目小组(task force),目的是保持活力。

企业正如人一样,是有生命周期的。企业也要经历出生、成长、成熟、衰老、死亡的历程。卓越的企业能够重生,是因为保持了新生企业的活力。

很多小企业希望从大企业学习的,却正是让大企业苦不堪言的"制度-流程主义"。

而事实上,在灵活性方面,大企业应该要向小企业学习。

无论大企业还是小企业,在完善制度流程和保持企业活力之间,必须达到平衡,这正是中国智者倡导的中庸之道。

(作者本名李峰,香港大学心理学博士,风里领导力创始人,效度邦测评机构共同创始人,他刚刚出版了《五大品质:卓越领导力心理基因解码》)

2010年6月29日星期二

同样60万,效果却两样,这就是差距!

二虎有个朋友,2008年初把房子卖了,让老婆孩子在当地租房子住,自己带着包括卖房在内的60万元人民币去非洲莫桑比克发展了。去年,这个朋友曾去考察过,说那儿商机无限,中国产的圆珠笔都能有300%的利润。于是这个朋友带着所有的钱一到非洲,就在当地注册了一家公司,又租下一个铺面。他觉得在莫国文化用品很好卖,已有许多华人在那儿开店经营这项业务,所以也想跟风。正在想着要到国内来进一个货柜的货呢,但他的钱好像一次只够进一个货柜,因为一货柜的文化用品基本上要20万元左右。而这位老兄去了几个月,生意还没做一笔,已经花掉了十多万元!

    二虎为了这个朋友进货的问题,专程跑了一趟温州,还专门就这个生意咨询了一下他原先认识的一个年轻的温州商人。

    温商寻思片刻,得出结论:“虽然有300%的利润,但你这个朋友肯定做不起来,如果做下去,肯定亏得一塌糊涂。”然后温商开始一一列出他的观点:

    其一,总共60万元人民币,就想像别人一样做文化用品,没有规模优势。因为别人做一次可能会进5到8个货柜,这样,人家的品种就多。另外,即使有一个货柜遇到问题,因为还有其他货,所以能将损失抵消到最小。而他基本上只能一次进一个货柜,品种少,如果这一个货柜出了点问题,他这笔单子的损失就是100%。

    其二,要理智地看待这300%的利润。他进的货往往是非常好卖的占1/3,进货成本看似回来了,但如果加上人工、房租等运行成本,可能要卖了2/3才能勉强持平,而真正赚钱的往往就是后面的1/3,但经常就是这1/3被积压在货架上或仓库里。讲起来他是赚钱了,但赚的还不是钱,而是1/3左右从国内进来的货品。

    其三,本小使得进货周期变慢。因为他的本钱少,一次进一个货柜,可能要慢慢销三五个月。这样,他商店的货品更新就很慢,顾客自然就会有点“审美疲劳”了,一旦失去了大部分的回头客,他的生意将非常惨淡。

    其四,跟风者很难赚到钱。当他看到人家做文具做得很好,他也跟着做。其实,人家做得好,可能已经做了相当长一段时间。从国内的货源到海运,到非洲报关,到消费者,已经形成了一定的人脉。而他从头开始,进入这个圈子,能跟人家拼什么呢?价格?他没有规模效应,没法跟人拼。难道他不做零售,搞批发吗?他的商圈能在极短时间里建成吗?

    二虎在被震惊的同时,又抛出了一个问题:“如果是你,有60万人民币,去非洲创业,你会怎么做?”

    温商说:“我会给老婆留下40万,这是家里后半辈子的活命钱,不能动。然后我带着20万去非洲。因为只有20万,我将不会去注册公司也不会租铺面。非洲天热,太阳镜应该比较好销,当然当地的购买能力不会很强,所以太阳镜要选特别便宜的。我会在温州或台州进一货柜这种非常便宜的太阳镜,一副1元左右。一货柜几万元钱就够了。而到了那边,我会做一个流动的地摊商,到处摆地摊卖,这种眼镜的零售应该相当于人民币6元至10元。毛利率已经比做文具高多了,但非常辛苦是一定的。就这么慢慢苦个两三年,肯定会一点一点赚到些钱,然后人脉有了,对那儿的市场也看得清楚了,再开始注册公司、租铺面。”

    同样的60万,效果却两样,这就是差距。

食堂老板给北大教授上的MBA课

“控制吃回扣,靠人管人不管用;要从源头控制;要把大权化成小权控制;要用规则法律控制;要让人自己控制自己。”

    经营食堂应该是最简单的小生意,假设你是食堂的小老板,怎样才能有效防范食堂采购中的贪污问题?这可是一道考管理者的综合题,因为任何商品的标准都不如粮油青菜油盐酱醋鸡鸭鱼肉复杂;任何商品质量都不如每天需要变换口味的饭菜难以衡量;任何产品的价格都不如员工顿顿吃的东西敏感。不信你试试看,你能管好一个食堂吗?

    食堂管理难题

    有人可能说,如果我是食堂的老板,食堂采购就是我管理的重点。必要的话,可以采取如下措施:

    “我、我老婆或者我的亲信亲自去买。”

    可是这样一来你不就成个体户了吗?你的食堂公司还能做大吗?如果再有第二个、第三个食堂你怎么管?再说了,别以为亲信就不会骗你的,人是这个世界上最高级,也是最易变的动物。在缺乏监督和约束的环境中,你老婆都会藏私房钱。一个深圳制衣厂老板自嘲地跟我说:“自从我丈母娘管了食堂后,我小姨子和小舅子家里就从来不买菜了。”仅靠亲情管企业是不行的。

    “那我就派两个人去买,

    一个买,一个监督。”

    可是管过企业的都知道,在现金交易,无发票,并且质量和价钱每天变化的菜市场中,采购者抵御诱惑的能力很差,靠人盯人不可靠的,因为两个人可以很快达成攻守同盟。我见过有的公司甚至还用三个人去买菜,两人负责买,一个人复秤。结果怎么样?除了整天吵架之外,仍然不解决问题。更关键的是:千万别忘了,你经营的可不是什么暴利生意,一个人能干的活,三个人干,你的饭菜成本怎么能下来?

    “那我就采取轮班制,

    每次去买的两个人都不同。”

    一看你就是不懂食堂生意。千万别小看油盐酱醋青菜土豆鸡鸭鱼肉这些人人都知道的东西,它们的采购可是很专业的活,不信你问你老婆和妈妈。一个不懂菜市行情的人往往会让小贩骗秤和欺价。如果你为了防止贪污,买的东西质次价高,你的食堂生意还有竞争力吗?

    “那就采购的人固定,监督的人轮换。”

    可是一个不懂行的人怎么可以有效监督一个天天采购的人?他可以非常容易地同供应商表演完美的双簧,让监督的人成为聋子耳朵。不仅如此,犯罪心理学证明:监督越严厉,人的犯罪心理越强,监狱就是最好的证明。采购者每天被不同的人盯着,这对采购者实际上是双重人格侮辱,因为它的假设是:一你不仅会贪污;二你还会拉别人下水一起贪污。如果你被这样假设了,不贪污都对不起自己了!还谈什么发挥主观能动性,同小贩斗智斗勇买便宜的青菜茄子猪肉粉条?

    “那我就公开招标选总供应商。”

    这又是外行话。的确一些大餐馆或饭店对饮料烟酒和粮油等商品采购用总供应商独家采购制度。这是因为这些商品是标准产品,而青菜土豆鸡鸭鱼肉是非标准产品,质量和价钱每天都可能变,你怎么制订标书?谁能预测,8月猪肉上涨10%,9月山东黄瓜大丰收每斤只卖1角?因此,即使你有总供应商,还是要有人知道行情,因为这些青菜副食可是你食堂成本的大头。

    看到此,我估计很多人开始纳闷:这么简单个食堂生意,管理竟然如此复杂?! 这就对了,因为你是外行。如果一个真正管过食堂,而且成功管理过食堂的人,这个问题对她(他)就是小菜一碟了。这就是管理永远是具体的道理——外行不能管内行。

    开源节流

    一次偶然的机会,我碰到一位真正管理过食堂的老板,他的一席话让我茅塞顿开。

    我问他:“你的食堂采购由谁负责?”

    他说:“看买什么。需要每天买的青菜副食由大师傅负责,不需要天天买的粮油酱味招标采购,清洁用品等杂项由食堂经理买,炉灶器具锅碗瓢盆等固定资产(他的定义)由我亲自负责。”

    我又问:“大师傅去买菜有人监督吗?”

    “没有,我们只监督买回来的东西是不是短斤少两,因为很多东西是大师傅去市场订,供应商给送;送来的东西由厨房小工复秤记录。”他说。

    “不怕大师傅吃回扣吗?”我问。

    他说:“不怕。这个食堂是物业公司的,每人每天只是7元钱的伙食定额,扣掉主食和其他费用,每人每天副食只有4元钱。大师傅要用4元钱,买回能做四菜一汤的材料已很不容易了,哪里还有吃回扣的缝儿?另外,我自己偶尔也逛菜市场,市价比较清楚。再说,他能不能吃回扣,根本不是我管理的重点。”

    嘿。我很奇怪,问:“为什么?”

    小老板说:“我做生意先讲开源,后讲节流。因为一个生意得先有营业额,后才能有利润。我的重点是如何让吃饭的人满意,他们满意了,他们公司才能给我续约。他们满意了,我同公司谈伙食承包费、水电费和客人招待费才容易。”

    “怎么才能让他们满意?”我继续问。

    “ 这些保安都是从农村来的小伙子,肚量大得很,要让他们满意首先得保证他们能吃饱。可是每人每天就这么点伙食费,怎么才能让他们吃饱?因此,必须精打细算。比如,不要买刚下来的新鲜菜、不要买质量好的菜,尽量买过季菜、处理菜;不要买活鱼,要买死鱼;不要买里脊肉,要买肥肉……买这些东西可不是一般人能买的,必须是做菜的大师傅。大师傅在菜摊看到便宜菜和肉时,脑袋里马上就能想像做什么菜,因此在讨价还价时,他可以立即作决定。否则买菜一个人,做菜一个人,天天得吵架。做餐馆的人哪个不知道,凡是有人投诉饭菜质量,大师傅一定会先找原材料质量不好的原因。所以我必须把这个权力交给大师傅,让他能像我妈妈那辈子的人一样,会过穷日子,用一点点的钱变着法让一家人尽可能吃好。可是大师傅不是我妈,得鼓励他才行。怎么鼓励?食堂就餐者每个月对饭菜质量有评分,评分越高,大师傅奖金就越高。”

    目标管理:将军赶路,不追小兔

    我靠在沙发上的身子不由自主地直了起来,这个不修边幅的小老板开始让我肃然起敬。我继续请教:“可是我的经验是:吃饭的人个个都是陈世美,新厨师做的饭菜,刚开始都挺好吃,可是吃着吃着就烦了,评分也就低了。”

    “ 那你要分析,就餐者对什么最在意?这个食堂吃饭的小伙子们对饭菜不满意,主要是分量上。我刚接手这个食堂时是,他们半自助餐。可是你知道了,凡是吃自助餐的人,都是眼大肚子小;尽量多要,吃不了,不是硬撑,就是偷着倒。食堂员工怕后边的人不够,就尽量少给,结果总吵架。做食堂的人都知道,合餐一定比分餐省;可是分餐卫生,方便和时髦,所以一般公司食堂大都采用分餐。可是你得看你的食客是什么人?如果都是白领当然要分餐了,人得先吃饱后吃好。于是,我终于说服物业公司把分餐制改成合餐制。我的条件他们不能拒绝,八人一桌、四菜一汤、公筷分菜、凑齐再吃。结果满意度一下子上升10个百分点。

    “ 不仅如此,要想少花钱吃饱饭,只有一招——多吃饭少吃菜。我和大师傅在制定菜式时就想方设法,让中午和晚间每顿饭都必须有一个口味重,能下饭的菜。比如:梅菜扣肉、红烧鱼、腌菜炒大肠、麻婆豆腐等。做这些菜必须多放油、盐、酱油、味精、调料,所以原材料也就不用很新鲜的,要知道死鱼比活鱼价钱差一半。

    “你看这才是我抓的重点。这个公司换过3个食堂外包,我们是最满意的。现在他们总经理也经常在食堂吃饭了,这几个月物价高涨,他还主动问我需不需要加钱。”

    我目不转睛地看着他,心想:管理者都懂目标管理,可是几个目标一打架,往往就把大目标忘了——很多企业为了防止吃回扣,把员工的积极性也搞没了。这个小老板显然是个能将军赶路,不追小兔的高手。

    管理客户期望

    小老板见我真心请教,很有些自豪,继续说:“做餐饮的人其实不怕投诉,因为顾客投诉的都是一些能看得见的毛病,这些毛病都好改,难就难在食客的口味上。黄老师,你说得对,经常吃这几个菜谁都烦了。这就是为什么餐馆不断换厨师和推新菜式的原因。可是我们做食堂比较惨,因为大部分员工没选择,只能在这里吃。于是他们往往把对饭菜的厌烦通过别的事情爆发出来,比如饭菜质量问题和服务态度不好。其实,每个人都有家,妈妈也就能做那几样菜,你怎么不烦?在外面跑来跑去,回到家一吃,还是妈妈做的饭菜可口。所以我做食堂跟别人不一样,别人都希望职工每天都来食堂吃饭,因为多吃一天,做食堂的人就多赚一天钱。我承包任何公司食堂,我都要求公司同意食堂每星期关一天,因为我的员工也要休息。其实真正的原因是,我要让那些整天在食堂吃饭的员工自己做一做,或者到外面饭馆换换口味,对比一下价钱,这样他们就知道我的饭菜物有所值。我有100%把握,他们用7元钱在任何地方,包括自己做,绝不可能比在我这里吃得好。”

    我真的遇到高人了,不知哪个管理大师说的:“营销的第一准则是管理客户期望,而不是仅仅满足客户。”看来这个只有中学文化的小老板是个无师自通的大师。

    顺应人性和自然规律

    我继续问:“很多食堂采购都让老板费脑筋,往往用很多方法去控制。他们的担心也是有道理的,每个人的菜金再低,几百人加到一起,一年下来细水长流也是一笔不小的数。你为什么对你的大师傅那么信任,他是你的亲戚吗?”

    小老板笑了:“我在深圳经营四个食堂,我哪里来那么多能做饭的亲戚?其实菜市场采购吃回扣的事,都是那些公司自己办食堂的人做的事,为什么?管食堂的人不懂行,再加上管食堂的人往往是什么行政部经理,他们还有很多别的事要管,不可能在食堂上下那么多工夫。这些大公司以为靠什么鬼复杂的程序、制度和人盯人监督就能解决回扣问题,那是瞎掰。同样是菜心,有的是今天刚从地里摘的;有的是前天摘的,淋上水都是新鲜的,你怎么监督?一副猪下水上午卖30元钱,到晚间5点以后就10元钱了。如果采购的人想给你省钱,他会跟摊主说,有剩下来的下水给我送来;如果他照章办事或心情不顺,你就要花30元。再说了,逢年过节供应商送他一条烟,下来的新鲜水果送他一篓,这些事你能管得住吗?更关键的是你需要管吗?所以管不来的事,就不能硬管;要换着方式管才行。我能管的是每人4元钱的菜金,你给我做出让吃饭人满意的四菜一汤;如果在这个前提下,你还能吃到回扣,那就是你的本事;如果你真有这个本事,你小子就不需要当大师傅了,你可以当食堂老板了。为什么,因为你能管好大师傅。”

    大多数人只知道“治大国如烹小鲜”,而不知道这只是半句话,其实老子的意思是:管理者如果能顺应人性和自然规律,治大国就如炒一碟小菜那样容易了。这个小老板显然是知道老子整句话的人。

    让所有人都有点小权

    我又问:“粮油酱味不是也会影响饭菜质量嘛,为什么不归大师傅一起采购?”

    小老板狡黠地看了我一眼,说:“这就是我的特殊管理方法。别的公司采购都统一,我就要分散。我认为一个人过手的金额越少,贪污的可能性也越小,不信你看那些大贪污犯都是权力大的人。为什么?过手金额太大,掉一点小渣对人诱惑就很大。我不知道为什么有些公司非要把所有东西都集中起来采购?不仅如此,其实很多东西,买的人不如用的人懂行。

    “ 所以我把采购权分开。把需要采购的东西,首先按性质分。是标准产品不管金额大小,能招标的就不独立采购,比如:粮油招投标,盐味精酱油醋这些东西虽然金额小,也招投标。这叫什么?尽可能不诱人犯罪。现在买十瓶啤酒都可以讲价,所以要尽可能把漏洞堵上。不能投标采购的,比如副食青菜,不论金额多大,要直接交给最懂行的大师傅。为什么?除了上面说的原因,我现在经营四个食堂,最高的伙食标准是每人每天20元,最低是7元,它们用的原材料都不一样,放到一起采购只能顾此失彼。扫把抹布员工制服这些杂品由每个食堂经理购买。这样人人负责一部分,不仅能买到最合适的东西,每人买的品种少、金额小,稍稍吃点差价,就容易暴露出来,比如:别的食堂拖把5元钱,你买的拖把10元钱,你能不心虚吗?

    “ 人这种东西,别人怎么管都不如自己管自己。我这样做还有一个原因,谁都知道买东西是个好活,被人家敬烟敬酒还请吃饭,还有可能拿回扣。可是好事就要尽可能大家都有份,不能我整天烟熏火燎,你整天在外面风光,否则就会引起嫉妒和流言蜚语。如果把权力分散开来,大家都可以沾光还可以互相监督。当然我也不是为了分散而分散,该集中的我还是要集中,比如:我把粮油酱味的招标权下放到一个食堂经理那里,由他代替其他五间食堂采购。当然招标是轮流坐庄,下一年由另外一个食堂的经理负责。

    “ 别人的老板都说:员工都想少干活多拿钱。我看不是,我觉得员工是想少干不好的活,比如洗菜擦地这些脏活和累活。如果让洗菜的小工监督过秤,不给他们钱都高兴干。为什么?不仅能到厨房外面凉快凉快,喘口气抽口烟,掌握秤杆子还能受到别人尊敬呀。他不仅需要复秤,还要记录;短秤了,还要找大师傅对证。是人,哪个不想有点权力?所以我的原则就是让所有人都有点小权。

    “ 人有权无责、有权无法都容易乱来。洗菜小工抽别人几根烟是小事,上万斤米面的采购就容易出大事。所以我虽然把米面的招标权力交给食堂经理,但是招标必须按我制定的方法招。我们的招标结果事先任何人,包括评标者都不可能知道。因为我们做的是吃的生意,入嘴的东西不能只斗价钱低,否则斗来斗去,什么毒米就混进来了。因此我的招标方法永远是:第一,至少有四家无关联的供应商投标;第二,必须有一家新的供应商;第三,中标者是最接近四家平均价钱的投标者。任何人违反这个规则,就等于犯了法,你必须要交代清楚。”

    老板越说越兴奋,我也越来越觉得他很神。我问他:“你以前做什么的?你这些招都是自己想出来的?”

    他说:“我今年45了,年轻时当过兵,后来到政府机关开车。再后来到深圳打工,打来打去也打不出头,就自己做生意,没有大本钱,就在工厂区开了间小饭馆,结果就开成了食堂。我都是在过程中悟出来的,控制吃回扣,靠人管人不管用;要从源头控制;要把大权化成小权控制;要用规则法律控制;要让人自己控制自己。”

    (文:黄铁鹰 梁钧平 北大光华管理学院教授)

2010年6月28日星期一

酒吧常见的“黑单”方法

夜场作弊方式与补救措施 一、单据漏洞

1. 单据领用无记录

一但丢失或出现问题没有责任者,无法查证。建立领取记录。

2. 单据无人核对号码,数量。

在使用后如发现无人核对,会有侥幸..
夜场作弊方式与补救措施 一、单据漏洞
1. 单据领用无记录
一但丢失或出现问题没有责任者,无法查证。建立领取记录。
2. 单据无人核对号码,数量。
在使用后如发现无人核对,会有侥幸心理的员工使用这样的漏洞进行作弊,而因无人查点而
瞒天过海,建立日审部门进行每日的核对单据工作。
3. 单据化单脚不规则
单据如果化单脚不规则,容易在使用后被人继续填写品种进行贪污,而因接手的人过多而无
法进行查证而让多人分担此后果。按规定填写酒水单。
二、服务员作弊
1. 借用酒水
服务员向熟悉的吧台人员借用酒水进行销售。吧台酒水不外借,违者重罚。
2. 剩余酒水
服务员将客人结帐后的酒水私藏,转手卖给客人,获取利润。客人结帐后请主管级以上人员
进行检查,将剩余酒水返还酒吧。
3. 服务员存酒
将剩余酒水找人带签后存放吧台,另日贩卖。吧台只存放高级酒类,一省空间,二以免给服
务人员有机可乘,另由主管请客人签字后送吧台存放。
4. 服务员私带酒水、香烟进场
带入后进行贩卖而获利润。在员工进场前由保安与主管级以上人员进行检查、监督,包括带
入的与本公司相同品牌的香烟。
5. 哄抬物价,赚取差价
不送酒单给客人,虚报物价。每桌必须放置酒水单或咭坐,客人来后也需留有一份酒牌。
三、服务员、吧台联合作弊。
1. 利用返还酒水
吧台将客人剩余酒水利用不下帐的手法,与服务员进行二次销售,建立返还登记本,厅面主管与酒吧主管共同签字做实。
2. 利用过期存酒
吧台人员将以存放过日期的酒水拿出,给服务员进行销售。一只存放高级酒类,二酒吧主管定期检查存酒,进行登记上报处理。
3. 借取服务员酒水
有意向的进行我出酒你贩卖的方针进行谋取利润,酒吧主管在收市后进行酒水每日盘点,如
发现缺少,按公司销售价格当日补足。
4. 勾兑酒水
将返还的剩余开瓶酒水进行勾兑与服务员在次进行销售,酒吧主管与厅面主管联合监督服务
员不可将开瓶酒水返还酒吧,另酒吧主管收市盘点时发现盘赢酒水立即入帐。
5. 可多次使用或无帐物品
如鲜花、冰块等,不使用单据而直接出品,吧台主管与厅面主管经常保持沟通与监督。
四、收银员、服务员联合作弊。
1. 退酒水
在客人买单后,有剩余酒水未及时返还酒吧,通过收银员、酒吧,退掉酒水,获取利润。收银员在客人买单后立即封单,如需要更改,须主管的签字,主观须与厅面主管、酒吧主管先行取得共实。
2. 作废单据
将结帐后的单据作废,用剩余的酒水或其他酒水顶替返还酒吧,共同分享利润。
酒吧主管、厅面主管及时监督检查。

   最可怕的方法:

1,还有模仿领导签单的

2,往待结的房间加酒水卖给其他现结的

3,管理人员给服务员签单牟利的

4,最怕的是吧台人员做“花帐”

5,库房和吧台联合就更可怕了。

应用行为战略消除决策偏见

即使是由最优秀的企业中最明智的管理者所制定的最重要的战略决策,也会受到认知偏见的影响。如果放任自流,潜意识层面的各种偏见就会损害战略决策。

  回想一下,你所在企业最近做出的一项重大业务决策:一项重大收购,一笔大额资本支出,或一种新产品上市,哪怕具有良好判断力的管理者负责进行的良好分析,并不会自然而然地产生良好的决策。利用行为经济学的发现,我们可以在决策中识别这些偏见,并为消灭它们制定出流程。

  曾被视为异端邪说的行为经济学现在已成为主流学科。基金经理们将该学科关于理性局限性的洞见应用于了解投资者行为,以及利用股价的异常波动盈利。政策制定者利用行为原理来提高退休储蓄计划的参与率。市场营销人员现在也明白了为何有些促销活动能吸引消费者,而有些活动则无人问津。然而,很少有企业的战略专家会在进行重要决策时,有意识地考虑行为经济学揭示出来的一些认知偏见——偏离理性考虑的系统性倾向。原因不难理解:不像在其他一些领域(如金融和市场营销),高管们可以利用心理学来认识大部分存在于别人身上的认知偏见,而企业战略决策的领导人则需要认识他们自己的认知偏见。因此,虽然管理学著述的作者们(包括我们自己)对行为经济学的认识在不断深化,并在推动其应用上做了许多努力,但是,大多数企业高管在了解如何利用行为经济学的威力上,仍然存在许多可以理解的困难。

  任何经验丰富的高管都会承认某些偏见的存在,并会考虑如何消除它们。当我们对一个直接下属提交的计划乘上一个折扣系数(以纠正此人的过分乐观)时,就是在做消除偏见的事。事实上我们担心某个人的建议可能被一己私利所歪曲,并要求中立的第三方发表独立见解时,也是在做消除偏见的事。

  然而,学术研究和观察经验表明,这些纠正偏见的做法过于粗略和有限,难以起到太大作用。企业决策中普遍存在偏见,部分是由于习惯、培训、高管选择以及企业文化在起作用。事实上偏见无所不在的最根本的原因是,它们是人类本性——固执己见、对反馈意见高度抗拒,而又简单粗暴——的产物。例如,因为高估自己的驾驶能力,造成自己发生交通事故而受伤住院的司机,与由其他人造成的交通事故的伤员人数不相上下。

  决策流程中的主要偏见

  为了改进战略决策,不仅需要努力减少我们自己(以及其他人)的偏见,而且必须制定能抵御不同偏见并限制其影响力的决策流程。用司法做一个类比,我们不能相信法官或陪审员永远正确,他们毕竟也是人。但是,作为公民,我们可以期望由陪审团和审判庭做出的判决遵循了正当的程序规则。它是通过团队合作以及组织团队的流程而获得的结果,因此是我们寻求的高质量结果。

  通过改变视角,抵制模式识别偏见 识别各种模式的能力有助于对人群进行分类,但是,它也会带来曲解概念关系的风险。普遍存在的模式识别偏见包括显著性偏见(它使我们过分看重最近发生或令人难忘的事件)和确认偏见(一旦形成了一种假设,就对证明该假设有误的证据熟视无睹的倾向)。这种偏见尤其对高管人员贻害无穷,他们具有丰富的经验,这就增大了他们从自己的经验出发,依赖类比推理的可能性,而这可能会使他们误入歧途。每当采用类推、比较方式或突出的例子来证明一项决策的正确性时,以及每当令人心悦诚服的佼佼者利用他们的说服力讲述一个吸引人的故事时,模式识别偏见可能正在起作用。

  对于我们所有人来说,模式识别是第二天性——而且往往具有极大价值,因此,要和与其相关的偏见作斗争就颇具挑战性。我们能够采用的最佳做法,就是通过鼓励参与者从不同的角度观察事实,并试验用不同的假设来解释这些事实,从而改变视角。采取这种做法时,首先可以从走访现场和客户这样简单的事情做起。然后可以采用一些会议管理技术(如重构会议或角色转换),鼓励与会者对他们提出的证据做出其他不同的阐释。还可以利用一些工具(如对抗性战争游戏),以促进不拘一格的创新思维。
通过承认不确定性,抵制行动导向偏见 大多数企业高管都能正确感知采取行动的必要性。然而,我们采取的行动往往受到对未来——尤其是对我们自己影响未来的能力——过分乐观的鼓动。我们很少将信心满满视为一种警告标志——这是过于自信、过分乐观,以及其他行动导向偏见可能正在起作用的一种迹象。

  出类拔萃的决策流程通过增进对不确定性的认识,来抵制行动导向偏见。例如,它通常有助于将决策会议与执行会议清晰而明确地区分开来,在决策会议中,领导人应该接受不确定性,同时鼓励发表不同意见;而在执行会议中,高管们则应该同心协力,共同前进。有一些工具也很有价值——如情景规划、决策树以及心理学家Gary Klein积极倡导的“事前验尸”项目评估法——这些工具会促使决策者考虑很多可能出现的后果。此外,在进行重大决策时,讨论需要对哪些指标进行监测,以便突出对过程进行快速修正的必要性,这一点也至关重要。

  通过改变现状,抵制稳定性偏见 与行动导向偏见相反,稳定性偏见使我们更不容易摆脱现状。此类偏见包括“抛锚”——最初的思路或数字对随后的战略对话具有强大的影响力(例如,在任何预算审查中,上一年的数据都是不容置疑而又极为有力的依据)。稳定性偏见还包括损失规避——一种确实存在的、对损失比对同等收益更敏感的倾向——和沉没成本误区,它可能会导致企业持有那些本应放弃的业务。

  为了诊断你的企业是否容易受到稳定性偏见的影响,一种方法是,对随着时间推移的企业决策进行比较。例如,尝试将企业每个部门逐年收到的新增投资总额的百分比绘制成图表。如果这一百分比保持稳定,但该部门的增长机会却在不断变化,这种结果就需要引起注意——这种情况相当普遍。例如,我们的研究表明,在那些拥有多种业务的企业中,在15年的时间范围内,一个业务单元当年的资本支出预算份额与其前一年的预算份额之间存在着近乎完美的相关性。类似的惯性也常常对广告预算和研发项目渠道造成不良影响。

  帮助管理者改变现状的一种方法是,制定需要竭尽全力才能达到、通过“一切如常”模式则不可能实现的目标。零负债(或低负债)预算方法听起来固然不错,但根据我们的经验,企业只有在深陷困境时才会采用这种方法。另一种可供选择的方法是,首先将每一个列入财务报表部门的预算都削减一个固定的百分比(如10%)。然后通过艰难的选择,将资源重新配置到更有价值的业务机会中。最终,具有挑战性的、更为精细的预算分配可以帮助企业重新安排其投资的优先顺序。

  通过使利益明晰化,抵制利益偏见 动机错位是偏见的一种主要来源。“孤岛思维”则是其最容易觉察的表现形式,按照这种思维方式,组织中的各个部门都竭力维护自己的利益。此外,由于高管人员的职务或职能专业不同,他们有时会对企业的目标有正当的不同看法。在激烈的争论中,与会者似乎是从完全不同的角度看问题,这种争论往往反映出存在不同的(而且通常是不会明说的)利益偏见。

  事实上,采用一种足够广泛(以及足够现实)的“利益”定义(其中包括名誉、职业选择和个人偏好),就会得出一个必然的结论:在一个管理者与另一个管理者之间,以及在管理者个人与作为整体的企业之间,总会存在利益冲突。强有力的决策流程要对不同的利益进行明确界定。例如,如果在决策之前,战略专家精确地制订出将用于评估决策的标准(或许不会使用),就会使个别管理者通过改变辩论条件,使他们首选的行动显得更具吸引力的做法更难实现。同样,安排其利益相互冲突的人参与决策会议或决策团队,可以减小局部利益会损害考虑周全的决策的可能性。

  通过非个人化的辩论,抵制社会偏见 社会偏见有时也被解释为企业政治,但实际上,它是根深蒂固的人性倾向。即使在没有任何威胁的情况下,我们也倾向于与自己所属的团体(及其领导人)占主导地位的观点保持一致。许多组织都在强化这些倾向,因为它们与强有力的企业文化和激励机制相符。缺乏不同意见就是一个强烈的警告信号。在决策讨论中,如果会议室里的每个人都知道最终决策者的观点(并且假定,该领导人不太可能改变主意),社会偏见也可能会占据上风。

为了在高管团队中激发辩论,有各种各样的技术可以应用,其中许多技术学习和实行起来都很简单。但是,工具本身并不能引起辩论:这是一个行为问题。真正的辩论,需要的是决策者在背景和个性上的差异、相互信任的气氛,以及一种使讨论非个人化的文化。

  最重要的是,这种辩论要求高层领导人真正信任一个高素质管理团队的集体智慧。这些高管不仅仅将自己看作是最终决策者,而且要把自己视为纪律严明的决策流程的组织者。他们以谦虚的态度影响管理团队,鼓励发表不同意见以及保持自信和相互信任,使辩论充满活力而又不会破坏人际关系。我们并不是建议首席执行官应该成为谦卑的听众,仅仅依赖其管理团队中多数人的意见来决策——这样将会用一种过于简单化的陈规陋习来代替另一种陈规陋习。不过,我们确实认为,如果缺少了高层领导人的领导力和角色楷模作用,行为战略就难以成功。

  采用行为战略的四个步骤

  技术本身并不会提高决策质量。毕竟,没有什么事情会比组织一次例行公事的辩论来证明一项已经由首席执行官做出的(或认为已被做出的)决策的正确性更容易的了。希望影响自己企业决策方式的领导人必须致力于采取新的决策步骤。

  决定哪些决策适用于行为战略 有些高管担心,应用我们在本文中描述的这些决策原则,可能会造成团队分裂,其作用适得其反,或者只是太耗费时间。我们同意,这些担忧不无道理,我们也不建议将这些原则应用于所有决策。这里,再次用司法例子进行类比会具有启发意义:正如适用于重罪案件的审判程序其标准要高于小额索赔法庭采用的审判程序一样,企业可以——而且应该——特别关注两种类型的决策。第一类是罕见的、独一无二的战略决策,重大兼并和收购、“用企业下注”的投资以及至关重要的技术选择等都属于此类决策。在大多数企业中,这些决策是由高管团队中的一小群人,采用一种特定的、非正式的而且通常是重复的流程做出的。

  第二类是具有重复性,但风险较高,随着时间推移会影响企业战略的决策。在大多数企业中,这种关键流程通常都不超过两个,例如,一家制药公司的研发资金分配,一家私募股权公司的投资决策,或一家公用事业公司的资本支出决策。为了做出这些决策,通常会采用正式的流程——这些流程往往会受到偏见的影响。

  确定最有可能影响关键决策的偏见 对可能破坏决策的偏见进行公开讨论是非常有价值的。可以采用两种方式来激发这种讨论,一是对过去的决策进行“事后验尸”,二是对当前的决策流程进行评价。在本次会议中,我们处在过于偏重行动的风险之中吗?我们看到,某人认为他识别出一种模式,但其类比分析的选择对我们似乎有误导作用吗?我们注意到,在各种偏见的共同作用下,产生了一些职能失调的模式,如果这些模式在一个组织中被不断地复制,可能会变成企业的文化特征吗?例如,社会偏见与现状偏见相结合,正在产生一种以多数人意见为转移的惰性文化吗?这种讨论将有助于使偏见(特别容易影响审议中的决策流程的各种偏见)浮出水面。

  选择各种做法和工具,抵制最密切相关的偏见 企业应该选择适合当前的决策类型、自己的企业文化以及自己领导人决策风格的决策机制。例如,一家我们所熟悉的企业为了抵制社会偏见,组织了一次由外部人士对其业务单元规划进行系统质疑的活动,作为其年度规划工作的一部分。另一个企业为了对抗模式识别偏见,要求提出了决策建议的高管人员与大家共享支持该建议的原始数据,以便企业中具有分析能力的其他高管可以尝试辨别各种替代模式。

  把纠偏的做法植入正式流程中 通过在正式的企业运营流程(如资本投资审批流程,或研发评审流程)中植入这些纠偏做法,高管们就能确保这些技术得到经常的有规律的应用,而不仅仅是在最终决策者对决策结果感到极不确定时才会使用。在可重现的流程中植入这些纠偏做法非常重要,原因之一是,我们了解的关于过分自信倾向的所有知识都表明,依靠一个人的本能来判定何时是在依靠一个人的本能是极不明智的!另一个原因是,良好的决策需要一个管理团队的实践:如果没有经常实践的机会,管理团队就会在原则上赞同它应该采用的技术,但却缺乏有效使用这些技术的经验(以及相互信任)。

  Dan Lovallo 是悉尼大学教授、加州大学伯克利分校商业创新研究所高级研究员和麦肯锡外部顾问;Olivier Sibony 是麦肯锡布鲁塞尔分公司资深董事。

  原载于《麦肯锡季刊》 (china.mckinseyquarterly.com) 。版权所有©麦肯锡公司 1992-2010。本文经麦肯锡公司授权转载。

2010年5月28日星期五

如何识别具有领导潜质的员工?

评价人才能力的基本因素有二个,即显性能力(指学历、专业、经历等可以以硬指标来衡量的能力)与隐性能力(指自信心、成就动机、个性特质、兴趣、决策模式等软指标,它们看不见也摸不着,但作为一种能力同样客观地存在于人才的身上)

判断员工是否具有领导潜质,应该看他的隐性能力而不是显性能力。例如某个员工即使他的学历与经历完全符合要求,但如果他是个性上掌控性很低,非常内向,决策风格上优柔寡断,是不可能成长为一个优秀的领导者的。

如何判断一个人才的隐性才能在领导岗位上是否有成长潜力呢?

1)岗位的挑战性如何?高挑战的岗位要求培养对象的自信心要高一些,否则以后面临着困难与挑战时,他内心的想法是“知足常乐”,“人生苦短,何必强求”。

2)该领导岗位未来的绩效目标是什么?培养对象的性格特质与岗位目标相匹配?开拓型的岗位需要一个人的掌控型性格;激励、品牌塑造、社交等岗位需要表现型性格;服务类岗位需要耐心型性格;专业研究、成本控制、流程规范需要细致型性格。试设想,如果想培养一个非常内向的人负责品牌宣传,是不可能取得优良的绩效的。

3)岗位的工作压力如何?是否需要经常加班?高压力的工作需要培养对象的精力特别旺盛。记住:精力是一种客观存在的隐性才能,正是因为精力的高低,同样是工作到晚上十二点,有些人仍然精力旺盛,有些人的大脑里面早已一团浆糊——绝不是他们不想努力。

4)岗位是否需要思维的高敏锐性?敏锐性是客观存在的另一种隐性能力,例如,高敏锐度的人很容易做到听话听音,低敏锐度者别人不把话不说透,他就不明白。如果一个需要作市场分析与预测的经理岗位,选择了一个低敏锐度的人来培养,那只会错失很多商机。

5)岗位是否需要作重大决策?这些决策是属于把握机遇型决策还是稳健型决策?决策模式同样是一种客观存在的隐性才能。有些人在决策时擅长于把握机遇,有些人则优柔寡断错失时机,不同的决策内容需要选择不同的人才培养。 

如果要有效地识别人才的隐性能力,720o能力矩阵”及“慧眼识才的12杆标尺”或许能给您提供一些指导。

2010年5月9日星期日

2010年1月19日星期二

“谷歌退出”中的人心向背(转载)

上周的新闻跌宕起伏,尤其是前半周,房产新政、百度被黑、谷歌退出、海地地震,桩桩件件拿出来做头版头条都是绰绰有余。不过,从个人感受而言,还是谷歌这一桩最有深长意味。

在我的所见所听中,中国民众对谷歌此举的看法有相当大的差异。文化圈里的人多为钦佩,赞赏这家美国年轻公司为了"不作恶"不惜放弃中国市场的担当,而这也与他们一贯以来对中共管制政策的不满一脉相承,特别是过去一年以来,中国政府公开或秘密地展开了一系列针对互联网表达的整肃,逼近自由派人士忍受底线。但另一些商界朋友或许是看惯了生意场上的尔虞我诈,他们多半认定,谷歌此举不过是一个讨价还价的策略,不可能放弃中国市场。当然,网络上也有大量发言判断此乃美国对华政治攻势中的一个组成部分,"希拉里与谷歌创始人的餐会就是明证"。

这些那些,其实都是我们这些局外人的猜想,"阴谋论"不见得就比信谷歌更高明。不过,在对这个第一眼看到就能明白是禁忌话题的报道中,中国大陆媒体人表现出的倾向性,在更强硬的宣传指令到来前,已经十分明显。

在谷歌声明考虑退出当晚,以都市报为代表的时政社会纸媒表现得比网络媒体更加激进。这有可能是因为宣传官员管理系统不同,比如说,对网媒所下的管制命令当晚尚未完全传达到传统媒体。但以对传统媒体主编们"心中有政治"的一贯要求来说,他们不可能在看到谷歌声明措辞和当日网媒表现(包括人民网"谷歌撒娇"一文)后,还不能判断出这里蕴含的风险。

所以,当1月14日各家报纸的电子版公布后,我有一个强烈感受:人心向背。

一般来说,对中国政府批评最激烈的人出现在高校等文化学术机构中,媒体人虽然也可以归入文化圈,但由于不那么"象牙塔",或者有所顾忌,多数表现得更为温和婉转,不直接上阵挑战威权。但在1月13日晚间,这些媒体人通过笔端表现出来的对谷歌的同情、支持,乃至赞赏,已经超越了他们的平均尺度。

南京《东方卫报》上,编辑记者们写满排比句,除了提前怀念Google诸项便捷功能之外,一开篇就暗讽央视会因为以后无需报道谷歌中国涉黄而"肯定寂寞"。自由派色彩浓厚的南方报刊就更不用说,《南方都市报》与《信息时报》都提供出大篇幅报道,对百度的嘲笑和"非法献花"的现场图片一个不少。

最出人意料的恐怕还算是《环球时报》。这份被自由派人士视作忠于中国执政党的"愚民"报纸,面对过往类似事例,最标准的基调就是"西方反动势力亡我之心不死"。但在1月14日的社评栏目中,除了表达对谷歌退出的惋惜之外,更花了近半篇幅,不算委婉地批评了中国网络管理者行政手段的陈旧粗放:"没有安全当然不会有通畅,但安全倘若造成阻塞,那就失去了高速的意义"。同时,在这份《人民日报》子报的当天头版文字中,对谷歌的火药味也远没有往常那般强烈。

肯定有一些记者编辑在那一夜是真心地被谷歌"不作恶"的赤子之心感动了,他们像闾丘露薇一样,为这个公司的信仰而击节,为多姆德副总裁说出了他们对信息管制一直以来的郁闷而叫好。当然,也不排除有一些人只是被谷歌先进的产品感动了,他们更担心的是以后无法享受到全世界最好的网络服务,他们单纯地希望谷歌与中国政府的叫战不要"城门失火,殃及池鱼"。

但不管是靠价值观还是产品线,谷歌的确赢得了多数中国媒体人的心,尤其是那些受益于信息流通的市场化媒体。工作性质决定了媒体人是整个社会中对外界形势最为敏感的一群,是能够很大程度引导普通民众观感的议题设置者,如果有针对他们的投票,2009年1月14日中国各地的报纸版面就是结果。

谷歌事件在媒体精英和意见领袖中的人心向背如此明显,或许中国的高级宣传官员也没有完全料到吧。Google毕竟不是Youtube、Facebook,得到了再让人失去,这样的打击足够让人冲动一次。

当然,这种倾向性只在1月13日晚得到了比较充分的表现,1月14日晚就已经是另一番风向了。网络媒体继续保持谨言慎行,而《环球时报》的排版电脑上,由人大教授金灿荣署名的"谷歌到底想干什么"也已经出现,"删除了数千假票"后的投票结果称,超过75%的投票者认为中国政府不应接受"没有审查",超过67%认为谷歌的做法构成对中国政治主权的侵犯――这份畅销报纸回到正轨,中国媒体的整体导向回到正轨。

(注:本文仅代表作者本人观点。联络邮箱:xudanei@gmail.com

2010年1月18日星期一

没了google可怎么活呀!

没了google可怎么活呀! 当初百度搜索结果大量的广告导致我一怒之下投了google搜索,后来发现google真的非常好用,gmail好用,google文档好用,博客搜索好用,照片,翻译,地图等等都好用,如果谷歌走了,真不知道以后怎么办了!!!

还有看了环球网的那个评论,一点也不客观。 首先环球网和新华社,人民网一样都是government controled,它招聘的编辑当然首要条件就是“爱国”,评论当然就不客观;其次环球网的投票还被他们删掉了支持谷歌的投票,这不是人为干预吗,我怀疑他们是不是增加了很多反对谷歌的投票!

希望以后google.cn停掉以后google.com还能用,因为google.com不受政府的审查,搜索结果很客观,有大量国外媒体对我们国家的评价,好的也有,坏的也有,很客观。反观我们自己的搜索引擎,花钱就可以把负面信息屏蔽掉(例如当初百度的三鹿三聚氰胺事件)。

如果google.com以后就想twitter和youtube一样被政府屏蔽掉,我们该怎么办?

 
以下为Redondo的回复:
我也在愁最坏的结果——Google被屏蔽了,我们有没有替代或者补救的措施。不过,WD应该不至于将Google完全屏蔽吧,虽然大半Google的服务处于被屏蔽状态,如:Youtube、Blogger、Sites、Groups、Picasa等等。如果彻底将Google Search屏蔽,那无疑是自绝于世界先进文明。Google是一家以技术立身的公司,在互联网上无疑Google是先进生产力的代表,而非WD。我是一个科研分子,离开Google,我的研究不是效率降低多少进度拖慢多少的问题,而是会彻底变成井底之蛙。
善用佳软上在讨论“Google服务的替代方案”(http://goo.gl/bNYF),感兴趣的朋友可以去看一下。

2009年11月11日星期三

(转载)文献阅读心得――研究论文阅读的原则与四种境界

文献阅读心得――研究论文阅读的原则与四种境界:

记得看过一个留美学生的一篇文章,意思是说,只要自己肯下功夫,通过阅读文献(主要是研究论文),在研究条件许可的前提下,即使没有高水平的导师,一样可以做出不同凡响的研究论文。我想,其关键就在于通过研读文献,可以得到许多信息,从而启迪自己对思维。下面本人就研究论文的阅读原则与境界,谈谈一点看法与心得。我想,研读研究类文献,达到了以下四种境界,就不怕做不出原创性的研究,就不怕达不到目标。

研究论文的阅读三原则:

1. 阅读高水平刊物登载的文章,也就是说研读影响影子高的刊物上的研究论文。刊物主要有两类:一是综合类科学论文刊物如Science,Nature;一是专业类刊物。

2. 主要采取精读的方式。使用这种方式时,要做读书笔记。重点记录自己的想法。通过这一方式重点是了解研究者采取了什么巧妙的实验路线和实验设计方案。(关于做读书笔记,并非做的越工整越好,建议阅读《思维导图》一书)

3. 大量阅读,即泛读。主要采用阅读摘要的方式进行。通过这种方式可以使自己了解某一领域的研究现状。

由于研读者获取和挖掘信息的能力不同,阅读研究论文会达到不同的境界:

境界一:"知事"

"知事",是指了解所读论文的研究内容和研究结果,即英文中的"What had been done? What was the result"。通过阅读摘要(Abstract)或概要(Summary),可以知道研究结果,即知道"What";而参读全文则可以知道实验方法和策略,即知道"How"。

境界二:"知人"

研读文献,一部分人只达到"知事"的水平。事实上,从文章中我们可以知道研究人员以及他或他们所在研究机构等背景资料。了解研究人员及其所在的研究机构,是我们要获得的信息的一个重要方面。通过获取这些信息,可以了解研究的背景。通常,许多重大的成果,都是长期研究的结果。了解研究及研究人员的背景,有助于了解论文的水平、研究的现状以及进行学术交流。

境界三:"知因"

实际上,达到以上两种境界并不难,关键是在于我们是否有这样的习惯和意识。那么,要达到第三境界,就需要有心人。当我们看到一篇高水平的文章,有三个问题需要我们思考。一是,为什么研究者能够想到做这个研究。一是,研究者为什么这样设计实验。另一个就是,如果让我们来做,我们会怎样设计我们的研究。实际上,对高水平的人来说,第三个问题通常是在阅读摘要或概要之后就思考的问题。这样对训练思维,提供水平极有帮助,尤其对我们这些受中国式教育,缺乏解决问题的人来说,更是不可缺少的环节。

境界四:"知短"

应该说,不是所以的研究论文是完美的,许多实验设计可以改进。至于所引出的未解决的问题,更是无穷尽。"真理不是绝对的",这是自然的奥妙。因此,拿到一篇文章,达到最高境界的人即刻可以看出研究的缺陷或破绽。这需要"功夫"极高的一流专家才能轻易地做到。



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Sincerely yours,
Chuntao Yuan
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2009年10月21日星期三

易读----------天涯精华帖子

http://www.xunlei-mz.cn/

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Chuntao Yuan
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2009年7月13日星期一

重组质粒的构建---经典

重组质粒构建是常用的分子生物学手段,其实只是最基本的方法,一般一个星期同时构建三二个组质粒是没有问题的。在国内先进的实验中,也大都是由实验员搞定。但是其中还是有些基本的技巧需要掌握。在这里将我的心得分享于大家,这也是我本人几年来一线工作时的经验积累,以期能为谷友提供借鉴,让大家在实验中少走弯路。所涉及内容如下:

1) 克隆基因的酶切位点问题

2) 载体酶切的问题

3) 连接片段浓度比的问题

在阐明上述问题同时,本人尽可能举些实验中的问题案例予以说明。

一、克隆基因的酶切位点问题

1、克隆位点选择的问题。首先要对目标基因进行酶切位点扫描分析,列出其所含酶切位点清单。然后对照质粒多克隆位点,所选择的克隆位点必须是目标基因所不含的酶切位点。这是常识,不赘述。

2、保护碱基数目的问题。在设计PCR引物时,引入酶切位点后,常常要加入保护碱基,这是大家所熟知的。但是保护碱基数量多少,可能被新手所忽视。这种忽视碰可能会大大影响后续的实验进展。

一般情况下,普通的内切酶只加入两个保护碱基,其内切反应就可以正常进行;而有一类,仅仅只加入两个保护碱基,其内切反应就不能正常进行,这是因为内切酶不能正常结合DN段上。如NdeI就属这类,需要加入至少6个保护碱基,常用的HindIII也要三个。

下面是我提供这类酶的列表及其所需最少的保护碱基数,相信下列将有助于大这家的实验设计。

NcoI   4

NdeI   6

NheI  3

NotI   8

PmeI   6

SacI  3

SalI   3

SmaI   3

HindIII 3

BstI   8

SphI   4

XhoI   3

XbaI   3

SmaI  4

案例分析一:本人最初曾选用NdeI克隆位点,未注意到保护碱基数目的问题,设计PCR引物时,引入NdeI酶切位点后,只加上两个保护碱基,一个月内没有进展,始终不能成功构建重组载体。后查文献得知症结所在,在NdeI序列后加上六个保护碱基后,迎刃而解。大家引以为戒啊。

现在普通酶我都引入三个保护碱基。现在碱基合成价格也不贵了,为保证酶切充分,连接顺利,不用节约那点钱,再说若一次不成功,重复实验花费时间与金钱更多,孰利孰弊,不言自明。呵呵。

二、载体酶切的问题

1、质粒的单酶切鉴定。这个问题似乎很简单,但我认为很有着重强调之必要。现在大家手头的质粒都是转来转去的,其中的各酶切位点状况如何,是否能被有效地切开,这些问题都是要核实的。因此,在实验开始之前必须对质粒载体进行单酶切鉴定。现在我每次构建之前,对所选择的克隆位点都要作一一鉴定,例如选择NdeI和HindIII作为克隆位点,就先分别对质粒上这两个酶的酶切位点进行单酶切鉴定。单酶切鉴定能有效地切开后,再发出引物合成定单,进行引物合成;若不能,就按"一"中原则进行调换。

2、连接反应的对照。在实验中,这步骤属于质粒载体与外源DN段的连接反应。成功与否,很大程度上取决于与质粒和DN段的酶切效果。一般情况下,都在通用缓冲液中进行双酶切,但这两种酶在通用缓冲液中酶切效率不一样,这可能导致部分的单缺口的质粒片段存在,这样,在连接反应中,即使在外源DN段存在下,这种单缺口的质粒片段能够进行更快速有效自我连接。最终结果是大量假阳性的菌斑生长。对照连接反应中,在不加入外源片段情况下,实验结果如果有菌斑生长,说明双酶切不充分,质粒DNA必须重新进行双酶切。

实验案例分析2:本人曾用XhoI和HindIII酶切位点构建重组质粒,对质粒进行双酶切后,直接就做连接,未上述两步鉴定,每次结果满板的菌斑。但就是没有阳性。后来对质粒进行单酶要鉴定后,发现XhoI酶切位点损坏。又是一个月没有进展,浪费精力和药品。血的教训啊。因为当时没有注意到:单切质粒是一条带,双切质粒也是一条带,电泳行为上是一样的,分辨不出。如果做上述任何一个鉴定就会知道问题出在那儿,呵呵。

实验案例分析3:本实验室一个号称实验严谨的大博士,用KpnI和HindIII构建重组质粒,一个月未果,只得阴性斑,不得阳性斑,后怀疑KpnI酶失效。迁怒KpnI,在我不知情下扔掉实验室所有KpnI酶。我得知后,问他做过上述两鉴定实验后,他支吾着说没有,后经鉴定HindIII位点失效。最后他责备本人暗中保留一手,没有倾攮相授。呵呵,他不自责自己不思考,只是木着脑袋做实验,反倒咬一口解铃人,再说我在那以前也不知道他遇到什么难题。呵呵,你说冤不冤?这世道啊!也可看出,实验室人员之间相互交流相当重要。

两星期前写了前两问题后,终于能抽时间写第三个问题,在做好前述两个方面工作后,这个问题相对简单。

三、连接时两片段浓度比问题

一般实验指导手册上都说质粒:片段=1:3(摩尔比),在实际操作中我以为在1:5甚至1:10为宜。做好"一、二",16℃
10小时后,每次都能有效地连接上。当然还有大肠杆菌感受觉态问题,我们以前自己做,现在懒得做了,都用"天为时代公司"的产品,感觉还不错(特别声明我不是天为公司内线,呵呵)。

这里介绍一个估测处DNA浓度的方法:DNA可以用紫外法检测,也可以电泳对比marker估测,在要求不是很精确情况下,大家不妨试试下面方法:

1. 取一平皿。

2. 薄薄倒一层含有EB的琼脂糖胶,凝固 (4 ℃可以存一个星期)。

3. 平皿背面可以画成小方格。

4. 一小格中点1 ul样品。

5. 另一小格格点1 ul DNA标准品(我一般用Takara 2000 DNA lander,1 ul相当60 ng)

6. 凉干后,紫外灯下根据亮度就可以估测了。

OK,我连接时这么估测浓度,5分钟就要可以知道两片段浓度。其实连接片段浓度比可以充许在一个范围内,1:5至1:10都可以,所以上述估测方法在这种情况下是行得通的。

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Sincerely yours,
Chuntao Yuan
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2009年5月24日星期日

Nature 简介

1. 概况

  • 全名:Nature 自然
  • 出版方:自然出版集团(The Nature Publishing Group),是英国麦克米伦出版公司(MacMillan.Ltd)的分支。
  • 影响因子:26.681(2006)
  • 创刊:1869年
  • 刊期:周刊,每周五出版
  • 定位:英国著名杂志《Nature》是世界上最早的国际性科技期刊,兼顾学术期刊和科学杂志,即科学论文具较高的新闻性和广泛的读者群。论文不仅要求具有“突出的科学贡献”,还必须“令交叉学科的读者感兴趣”。自从1869年创刊以来,始终如一地报道和评论全球科技领域里最重要的突破,在世界品牌实验室(World Brand Lab)编制的2006年度《世界品牌500强》排行榜中名列第五十四。
      自然出版集团(Nature Publishing Group)出版的Nature系列刊物有三类:
        综述性期刊(Nature Reviews Journals),对重要研究工作进行综述评论;
        研究类期刊(Nature Research Journals),以发表原创性研究报告为主;
        临床医学类期刊(Nature Clinical Practice Journals),对医学领域重要的研究进展做出权威性解释,并促进最新的研究成果转变为临床实践

  • 系列子刊:

    * 研究类期刊(Nature Research Journals)

      《自然生物技术》Nature Biotechnology
      《自然细胞生物学》Nature Cell Biology
      《自然遗传学》Nature Genetics
      《自然免疫学》Nature Immunology
      《自然材料》Nature Materials
      《自然医学》Nature Medicine
      《自然神经科学》Nature Neuroscience
      《自然结构生物学》Nature Structural Biology


    * 综述性期刊Nature Reviews Journals

      《自然癌症综述》Nature Reviews Cancer
      《自然药物发现综述》Nature Reviews Drug Discovery
      《自然遗传学综述》Nature Reviews Genetics
      《自然免疫学综述》Nature Reviews Immunology
      《自然分子和细胞生物学综述》Nature Reviews Molecular and Cell Biology
      《自然神经系统科学综述》Nature Reviews Neuroscience
      《自然微生物学综述》Nature Reviews Microbiology

    * 临床医学类期刊Nature Clinical Practice Journals

      《自然心血管临床应用》Nature Clinical Practice Cardiovascular Medicine
      《自然内分泌学与代谢临床应用》Nature Clinical Practice Endocrinology & Metabolism
      《自然胃肠病学与肝脏学临床应用》Nature Clinical Practice Gastroenterology and Hepatology
      《自然神经学临床应用》Nature Clinical Practice Neurology
      《自然肾病学临床应用》Nature Clinical Practice Nephrology
      《自然眼科学临床应用》Nature Clinical Practice Oncology
      《自然风湿病学临床应用》Nature Clinical Practice Rheumatology
      《自然泌尿外科学临床应用》Nature Clinical Practice Urology

  • 中文门户http://www.natureasia.com/ch/(Nature亚洲简体中文版)杂志包括部分精华文章的中文摘要,更新迅速,同时有“前十名下载”排行供读者了解关注热点。

    2. 栏目设置及相关投稿要求

  • 杂志的主要栏目及相关投稿要求

    * 栏目设置

      Articles (论文)
      Letters (读者来信)
      Editorials (社论)
      Research Highlights (研究亮点)
      Journal Club (杂志俱乐部)
      News (新闻)
      News Features (新闻特写)
      Correspondence (通信)
      Books and Arts (书本与艺术)
      Essay (短文)
      News and Views (新闻与观点)
      News and Views Q&A (新闻观点问与答)

    * 投稿相关

      《Nature》杂志反映原始研究工作的主要论文格式是“读者来信”(Letters)和“论文”(Articles)。Article是较短的原始研究工作报告,集中反映某一重要发现,它的重要性意味着其他领域的科学家也会对其感兴趣。Letters是反映原始研究工作的报告,其结论代表着人们在理解某一重要问题上所取得的一个实质性进展,许多不同领域的读者都会对其感兴趣。
    网上投稿:http://www.nature.com/nature/authors/submissions/subs

    3. 获取该杂志信息的渠道

  • 本校资源:Nature网站http://www.nature.com/nature/index.html提供1950年到最新出版杂志的全部内容和1949年以前的部分内容。学校图书馆期刊室提供纸本杂志。
  • 中文门户http://www.natureasia.com/ch/(Nature亚洲简体中文版)提供部分精华文章的中文摘要,更新迅速,有“前十名下载”排行供读者了解热点。
  • 多媒体资源
    * 音频资源http://www.nature.com/nature/index.html
    * 视频资源http://www.nature.com/nature/videoarchive/

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    Chuntao Yuan
    Shanghai Research Center for Model Organisms
    No.3577 Jinke Road,Pudong New District
    Shanghai, China 201203

    Science 简介

    1. 概况

  • 全名:Science 科学
  • 出版方:美国科学促进会(American Association for the Advancement of Science)。AAAS属非营利组织,创于1848年,是全世界最大的综合科学学术组织。以“发展科学,服务社会”为宗旨,对象达1千万,覆盖130个国家。
  • 影响因子:30.0(2006)
  • 创刊:由美国“发明大王”Thomas Edison于1880年创刊。
  • 刊期:周刊,每周五出版。
  • 定位:《Science》属于综合性科学杂志,它的科学新闻报道、综述、分析、书评等部分,都是权威的科普资料,该杂志也适合一般读者阅读。
      发表的论文涉及所有科学学科,特别是物理学、生命科学、化学、材料科学和医学中的研究进展。发表的论文中60%有关生命科学,40%是属于物理科学领域的。
  • 中文门户http://china.sciencemag.org/ 主要含:杂志部分内容的选译,杂志登载的有关中国的新闻以及有中国大陆科学家署名文章的汇集。但更新较慢。

    2. 栏目设置及相关投稿要求

  • 杂志的主要栏目及相关投稿要求

     1) 科学新闻(Science News):报道世界各地的科学实况。
     * 有本周新闻(News of the week)主要报道科学政策和科技新闻。
     * 和新闻聚焦(News focus)更深入的专题报道。

     2) 科学指南(Science’s Compass): 有社论(Editorial)、读者来信(Letters)、政策论坛(Policy Forum)、科学与社会短文(Essays on Science and Society)、书评(Books Reviews)、研究评述(Perspectives)、综述(Reviews)、技术特写(Tech. Sight)等,分别讨论科学政策、科学与社会如何交叉的不同观点,评论分析当前研究的发展,谈论具有跨学科意义的最新进展以及未来可能的发展方向,介绍领先的实验技术以及新出版的软件。
     * 读者来信(Letters)一般不超过300单词,讨论《Science》上已发表的内容或普遍感兴趣的问题。来信应该直接投到www.letter2science.org或以电子邮件形式投来(science.letters@aaas.org)。编辑可能对来信加以修改以求明了或满足版面的限制。
     * 政策论坛(Policy Forum)一般在2000单词以下,讨论科学政策。
     * 科学与社会短文(Essays on Science and Society)也在2000单词以下,着重于表述科学与社会如何交叉的不同看法。
     * 书评及其它(Books et al.)在1500单词以下,评论《Science》读者感兴趣的书、只读光盘、展览或影片。
     * 研究评述(Perspectives)在1000单词以下,评论分析当前研究的发展,但作者不以讨论自己的研究工作为主。
     * 综述(Review)文章一般长度为4个版面,讨论具有跨学科意义的最新进展,着重于尚未解决的问题以及未来可能的发展方向。文章都要经过审稿。这类文章要求有摘要、概括主要观点的引言和反映章节主要内容的小标题。参考文献建议不要超过40条。
     * 技术特写(Tech. Sight)2000单词以内,介绍当前的试验技术以及新出版的软件。

     3) 研究成果(Research):是杂志最重要的一部分,包括研究文章(Research Articles)、报告(Reports)、简讯(Brevia)和技术评论(Technical Comments)。研究成果栏目中的论文考虑到广泛的读者群,因此,介绍研究工作背景和其重要性的引言、清晰的图片及说明十分重要。
     * 研究文章(Research Articles)栏目发表反映某一领域的重大突破的文章,文章长度不超过4500单词或5个版面,包括摘要、引言和加有简短小标题的内容部分。参考文献建议最多不超过40条。
     * 报告(Reports)栏目发表新的、有广泛意义的重要研究成果。长度不超过2500单词或3个版面。报告要包括摘要和引言。参考文献应在30条以内。
     * 简讯(Brevia)报道能够广泛吸引科学家的、学科间的实验和分析结果,长度不超过800单词或1个版面。
     * 技术评论(Technical Comments)讨论《Science》周刊过去6个月内发表的论文,长度不超过500单词。原文章作者将被给与答复评论的机会。

  • 网上投稿:http://www.submit2science.org/ws/menu.asp

  • 官方网站http://www.sciencemag.org/的主要栏目
     * Science magazine《科学》周刊
     * Science online《科学》在线:新闻以及原创性研究成果。
     * Science Careers职业发展网:提供有关招聘,求职,职业发展指导。
     * Science Now今日科学:每日科学新闻。
     * Science Express科学快报:高级在线发行服务
      所有最重要的论文都会首先在网站Science Express栏目中出现。
     * Science Signalling 信号转导专刊(原名Science STKE)
     * Science Sage KE(Science of Aging Knowledge Environment)衰老科学知识环境
     * Multimedia多媒体资料:视像以及声像资料
     * Science Collections科学专辑:杂志及网站过往内容的分类及链接。
     * Science Netwatch其他网络资源:Internet上吸引人的科学网址及综述。
     * Science Products:有关某一专题的综论类文章及多种相关新产品的信息。有广告性质。
     * Science for Kids少儿科学频道

    3. 获取该杂志信息的渠道

  • 本校资源
     * Science Online数据库http://www.sciencemag.org:学校暂时没有续订,因此不能获取最新期刊的全文。作为免费个人用户在science online注册(Free individual registration)后可免费获取更多内容。
     * 图书馆Science纸本刊物:现刊架号437-438
     * 部分过刊的全文:
      ・ JSTOR西文过刊库收录了Science(1880—2000)的全文http://library.sysu.edu.cn/mdb/database/jstor.htm
      ・ EBSCOhost数据库收录了Science(1997-2004)的全文http://library.sysu.edu.cn/mdb/database/ebsco.html
  • 中文门户http://china.sciencemag.org/
      由中国国家科技文献中心支持成立。但目前只更新到2007年。


  • 2009年5月22日星期五

    经典PCR疑难解答-----除了前引物和后引物的Tm不能相差太大,我们还要重点考虑以下因素

    除了前引物和后引物的Tm不能相差太大,我们还要重点考虑以下因素:

    一、GC% GC含量
    对于PCR反应来说GC含量在40%—60%,一般50%左右比较合适;而对于测序引物和杂交探针来说GC含量至少应为50%。产物中GC含量最好大于引物中的GC含量。
    二、Degeneracy 多义性
    当设计多义引物时应尽量减少引物多义性,这样会带来更好的特异性,应尽量避免3末端的多义性,因为这里即使一个碱基的错配都能阻止引物延伸。
    三、3’ End Stability 3 末端稳定性
    引物稳定性影响它的错配效率,一条理想的引物应该有一个稳定性较强的5 末端和相对稳定性较弱的3 末端。如果引物3 稳定性强,有可能在即使5 末端不配对的情况下造成错配,形成非特异性扩增条带(secondary bands) 。而3 末端稳定性低的引物较好的原因是在引物发生错配时,由于3 末端不太稳定引物结合不稳定而难以延伸。
    四、GC Clamp GC钳
    引物与目的位点的有效结合需要有稳定的5 末端。这一段有较强稳定性的5 末端称为GC钳。它保证引物与模板的稳定结合。选择有合适稳定性的引物能在确保不产生非特异性条带的前提下尽量降低退火温度。
    五、Secondary Structures 二级结构
    二级结构是引物设计中必须考虑的一个重要因素。二级结构能显著影响反应中能与模板正确结合的引物数量,发卡结构的存在能限制引物与目的位点的结合能力,从而降低扩增效率,形成发卡环的引物则不能在PCR扩增中发挥作用。
    六、Hairpin 发卡结构
    发卡结构的形成是由于引物自身的互补碱基分子内配对造成引物折叠形成的二级结构,并由于发卡结构的形成是分子内的反应,仅仅需要三个连续碱基配对就可以形成。发卡结构的稳定性可以用自由能衡量。自由能大小取决于碱基配对释放的能量以及折叠DNA形成发卡环所需要的能量,如果自由能值大于0 则该结构不稳定从而不会干扰反应,如果自由能值小于0 则该结构可以干扰反应。
    七、Dimer 二聚体
    引物之间的配对区域能形成引物二聚体,它是相同或不同的两条引物之间形成的二级结构。它造成引物二聚体扩增并减少目的扩增产物,二聚体可以在序列相同的两条引物或正反向引物之间形成,如果配对区域在3 末端问题会更为严重,3 末端配对很容易引起引物二聚体扩增。
    八、False Priming 错配
    如果引物可以结合除目的位点外的其他区域,扩增效率将明显降低目的产物带将减少或出现涂布(smear)。3 末端连续几个碱基配对形成错配的倾向要高于引物上游区域同样数量的碱基配对,在使用引物设计软件时,您可以分别设定确认为错配的3 末端或引物全长形成连续碱基配对的数量。

    如果是新手,刚开始接触引物设计,推荐使用Primer Premier 5.0,因为它界面简单,易学易用;如果你想把引物设计得尽善尽美,公认的首选软件是Oligo,其次我认为是DNAstar。Oligo功能强大,所以使用起来就没有Primer Premier 5.0那么简便。先用Primer Premier 5.0设计,然后把设计好的引物拿到Oligo里去检测这对引物的优劣,我想这对大多数引物设计者是一个不错的选择!

    补充一:具体说一下引物中GC含量问题
    引物的GC含量一般为40-60%,以45-55%为宜,过高或过低都不利于引发反应。有一些模板本身的GC 含量偏低或偏高,导致引物的GC含量不能在上述范围内,这时应尽量使上下游引物的GC 含量以及Tm 值保持接近(上下游引物的GC含量不能相差太大),以有利于退火温度的选择。如果G-C比例超出,则在引物的5’端增加As或Ts;而如果A-T比例过高,则同样在5’端增加Gs或Cs。但也有认为:原来普遍认为PCR引物应当有50%的GC/AT比率的观点其实是不对的,以人基因组DNA为模板,用81%AT的引物可以产生单一的、专一的、长250 bp,含有70% AT的产物。完全没有必要复杂地去计算产物和引物的解链温度,PCR引物的GC/AT比率应当等于或高于所要放大的模板的GC/AT比。

     补充二:关于自由能问题(如何根据自由能判断引物质量)
    1、ΔG值(自由能)反映了引物与模板结合的强弱程度。一般情况下,引物的ΔG值最好呈正弦曲线形状,即5’端和中间ΔG值较高,而3’端ΔG值相对较低,且不要超过9(ΔG值为负值,这里取绝对值),如此则有利于正确引发反应而可防止错误引发。3′末端双链的ΔG是0~-2 kcal/mol时,PCR产量几乎达到百分之百,随着其绝对值的增加产量逐渐下降,在-6时只有40%、到-8时少于20%、而-10时接近于0。
    2、引物二聚体及发夹结构的能量一般不要超过4.5,否则容易产生引物二聚体带而且会降低引物浓度从而导致PCR 正常反应不能进行,与二聚体相关的一个参数是碱基的分布,3’端的连续GGG 或CCC 会导致错误引发。二聚体形成的能值越高越稳定,越不符合要求。与二聚体相同,发夹结构的能值越低越好。虽然有些带有发夹环,其ΔG为-3 kcal/mol的自身互补引物也可以得到不错的结果,但是如果它的3′末端被发夹环占据时就很麻烦,即会引发引物内部的延伸反应,减少了参与正式反应引物的数量。当然,如果发夹环在5′末端对反应就没有多大的影响了。

    补充二:关于自由能问题(如何根据自由能判断引物质量)
    1、ΔG值(自由能)反映了引物与模板结合的强弱程度。一般情况下,引物的ΔG值最好呈正弦曲线形状,即5’端和中间ΔG值较高,而3’端ΔG值相对较低,且不要超过9(ΔG值为负值,这里取绝对值),如此则有利于正确引发反应而可防止错误引发。3′末端双链的ΔG是0~-2 kcal/mol时,PCR产量几乎达到百分之百,随着其绝对值的增加产量逐渐下降,在-6时只有40%、到-8时少于20%、而-10时接近于0。
    2、引物二聚体及发夹结构的能量一般不要超过4.5,否则容易产生引物二聚体带而且会降低引物浓度从而导致PCR 正常反应不能进行,与二聚体相关的一个参数是碱基的分布,3’端的连续GGG 或CCC 会导致错误引发。二聚体形成的能值越高越稳定,越不符合要求。与二聚体相同,发夹结构的能值越低越好。虽然有些带有发夹环,其ΔG为-3 kcal/mol的自身互补引物也可以得到不错的结果,但是如果它的3′末端被发夹环占据时就很麻烦,即会引发引物内部的延伸反应,减少了参与正式反应引物的数量。当然,如果发夹环在5′末端对反应就没有多大的影响了。


    补充二:关于自由能问题(如何根据自由能判断引物质量)
    1、ΔG值(自由能)反映了引物与模板结合的强弱程度。一般情况下,引物的ΔG值最好呈正弦曲线形状,即5’端和中间ΔG值较高,而3’端ΔG值相对较低,且不要超过9(ΔG值为负值,这里取绝对值),如此则有利于正确引发反应而可防止错误引发。3′末端双链的ΔG是0~-2 kcal/mol时,PCR产量几乎达到百分之百,随着其绝对值的增加产量逐渐下降,在-6时只有40%、到-8时少于20%、而-10时接近于0。
    2、引物二聚体及发夹结构的能量一般不要超过4.5,否则容易产生引物二聚体带而且会降低引物浓度从而导致PCR 正常反应不能进行,与二聚体相关的一个参数是碱基的分布,3’端的连续GGG 或CCC 会导致错误引发。二聚体形成的能值越高越稳定,越不符合要求。与二聚体相同,发夹结构的能值越低越好。虽然有些带有发夹环,其ΔG为-3 kcal/mol的自身互补引物也可以得到不错的结果,但是如果它的3′末端被发夹环占据时就很麻烦,即会引发引物内部的延伸反应,减少了参与正式反应引物的数量。当然,如果发夹环在5′末端对反应就没有多大的影响了。



    补充二:关于自由能问题(如何根据自由能判断引物质量)
    1、ΔG值(自由能)反映了引物与模板结合的强弱程度。一般情况下,引物的ΔG值最好呈正弦曲线形状,即5’端和中间ΔG值较高,而3’端ΔG值相对较低,且不要超过9(ΔG值为负值,这里取绝对值),如此则有利于正确引发反应而可防止错误引发。3′末端双链的ΔG是0~-2 kcal/mol时,PCR产量几乎达到百分之百,随着其绝对值的增加产量逐渐下降,在-6时只有40%、到-8时少于20%、而-10时接近于0。
    2、引物二聚体及发夹结构的能量一般不要超过4.5,否则容易产生引物二聚体带而且会降低引物浓度从而导致PCR 正常反应不能进行,与二聚体相关的一个参数是碱基的分布,3’端的连续GGG 或CCC 会导致错误引发。二聚体形成的能值越高越稳定,越不符合要求。与二聚体相同,发夹结构的能值越低越好。虽然有些带有发夹环,其ΔG为-3 kcal/mol的自身互补引物也可以得到不错的结果,但是如果它的3′末端被发夹环占据时就很麻烦,即会引发引物内部的延伸反应,减少了参与正式反应引物的数量。当然,如果发夹环在5′末端对反应就没有多大的影响了。

    补充三:关于产物需要测序的PCR引物的设计问题
    在DNA测序的PCR中最好用5′末端稳定(如GC含量较多),而3′末端不太稳定(如AT含量较多)的引物,这种引物的结构可以有效地消除假引发反应。这就是基于引物内部稳定性的经验之谈。其3′末端稳定性低的引物在这些反应中能起好作用的原因在于,接近或在3′末端上的碱基与非靶位点碱基所形成的配对的稳定程度还不足以引发DNA合成,所以不会产生假产物。因此,为了有效地引发反应,引物的5′末端和中央部分必须与靶DNA也形成双链。与此相反,带有稳定的、GC丰富的3′末端的寡核苷酸不需要其所有的核苷酸序列都与靶序列配对,只凭借其3′末端与靶序列任何位点的牢固配合就可以引发反应,产生非专一产物。无论如何,寡核苷酸3′末端最后5个核苷酸的稳定性小于-9 kcal/mol的,通常就是专一性的探针或引物。寡核苷酸3′末端越不稳定,假引发的可能性越低。


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    饭后保健 与 饭前养生

    有些人十分注意饭后保健,其实很多保健措施在饭后施行并不科学,而如果

    把这些保健方法从饭后移到饭前,效果会更好。

           运动前腹中空空,脂肪细胞内尚无新的脂肪酸进入,运动能将其“动员”出

    来化为热量而消耗掉。饭前1小时快步走或慢跑,持续30至45分钟,效果比饭后

    运动要好得多。

            水果    饭后吃进人体的水果会被先吃下去的食物阻滞于胃中,产生发酵反应

    甚至腐败,使人出现胀气,便秘等症状,给消化功能带来不良影响。如果将吃水

    果的时间提至饭前,对免疫系统有益,而饭后吃水果则没有这种养生功效。

           午睡    人进餐后血液涌向肠道,去帮助消化食物,致使流向大脑和四肢的血

    液减少,大脑和肢体便得不到足够的氧气与养分供给,乳酸等代谢产物也无法及

    时排出,易引起消化不良的症状。如果改成饭前睡觉,先吃点水果或喝杯牛奶后

    上床午睡半小时到1小时,然后再进午餐,这样的午休能更有效消除疲劳。

           喝汤    许多人习惯吃饱饭再喝汤,而饭前喝汤可以给口腔,食管,胃,肠等

    食物的必经之道加点“润滑剂”,使食物能顺利下咽,以减少硬食物对消化道黏

    膜的刺激。


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    protocol http://www.studentsguide.in/index.html

    http://www.studentsguide.in/index.html

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    2009年5月13日星期三

    生物学在线词典

    以下是生物学在线词典,全部验证过,保证有效.

    1.
    通用词典:
    一个将多个在线词典集成起来的专业词典网站,很好!******
    http://mirror.internux.co.id/med.sc.edu/www.med.sc.edu:85/dictio6.htm

    OneLook *****
    http://www.onelook.com
    极好的网站,是一个词汇搜索引擎,找出一个词在各个词典中的解释,给出链接。

    http://www.infoplease.com/dictionary.html *****
    140000个条目,优点在于搜索一个词的时候它会同时找出相关的词,如搜索plasmid ,同时会给出transfectionlysogenicrecombinant DNA technology
    episome
    vectorconjugation

    郑州大学的在线英汉、汉英科技大词典:
    http://www3.zzu.edu.cn/zzjdict/

    2.
    生物学

    英汉生物学词汇(繁体)
    http://www.cmi.hku.hk/Ref/Glossary/Bio/a.htm
    这是香港大学的生物学词汇,具体的翻译名词可能稍有不同,应该差异不大。

    生命科学词典(ya_hoo战友曾经推荐)
    http://biotech.icmb.utexas.edu/search/dict-search.html *****
    包括生态学、湖沼学、湖泊学、药理学、药物学、生物工艺学、医学等方面的专业术语,词汇量约8300

    Paul
    博士的生物学词典
    http://old.jccc.net/~pdecell/bio122/words/scanner.html

    Kimball's Biology Pages ****
    http://users.rcn.com/jkimball.ma.ultranet/BiologyPages/
    一个相当好的网站,不仅仅是解释,还有相关链接、图片、分子结构式等。

    生物学词典
    http://www.emc.maricopa.edu/faculty/farabee/BIOBK/BioBookgloss.htmlhttp://www.biology-online.org/dictionary.asp
    1800
    个词汇

    UCMP
    的生物学字典
    http://www.ucmp.berkeley.edu/glossary/glossary.html
    包括Biochemistry, Botany, Cell Biology, Ecology, Geology, Life History, Phylogenetics, Zoology

    http://www.angelfire.com/nv/biology/dictionary.html

    生物学词汇
    http://www-sequence.stanford.edu/~ssmith/thesis/node93.html
    编排地不好,不多

    生物技术缩略词词典 ****
    http://darwin.nmsu.edu/~molbio/bioABACUShome.htm
    非常棒!

    生物学词汇中的前后缀字典 **
    http://alpha.furman.edu/academics/dept/biology/bioterms.htm
    不多,挺有用,建议看看

    英日生物学词典
    http://lsd.lab.nig.ac.jp/WebLSD/lookup.html
    学日语的同学可以看看

    生物技术与食品词汇集
    http://www.agen.ufl.edu/~foodsaf/wi008.html
    A-M
    http://www.agen.ufl.edu/~foodsaf/wi008a.html
    N-Z)
    词汇量600

    基因组学词汇表 ***
    http://www.ornl.gov/TechResources/Human_Genome/glossary/
    英英,可下载词汇表

    基因专业词汇 ****
    http://immuneweb.xxmc.edu.cn/Terms/Glossary/findterm.htm

    细胞与分子生物学词典(第三版) ya_hoo战友曾经推荐) *****
    http://www.mblab.gla.ac.uk/dictionary/
    该词典囊括了现代细胞与分子生物学领域最新出现的专业名词,词汇量超过7000,非常适合学生与专业人士查阅。(还有一张词典导航图,很有意思)

    生化与分子生物学词汇(ya_hoo战友曾经推荐) ****
    http://www.portlandpress.com/pp/books/online/glick/search.htm
    2003
    7月更新

    遗传学词汇 ****
    http://www.genome.gov/glossary.cfm
    有文本和语音解释

    遗传学词汇
    http://helios.bto.ed.ac.uk/bto/glossary/

    遗传学词汇 ****
    http://www.weihenstephan.de/~schlind/genglos.html
    超链接形式的,很好!

    细胞因子词汇集
    http://www.copewithcytokines.de/cope.cgi
    词汇量2000,包含血液学等方面的内容

    生物信息学词汇
    http://www.cab.zju.edu.cn/issi/laborate/Bioinplant/courses/app1.pdf
    樊龙江的《生物信息学札记》的附录部分——西金克东木提供

    生物信息学词汇 ***
    http://www.ebi.ac.uk/cgi-bin/search/glossary.pl
    400词汇,不错

    生物信息学词汇
    http://www.no.embnet.org/embnet.news/vol2_2/glossary.html
    解释偏简单

    生物多样性词汇
    http://www.wri.org/wri/biodiv/gbs-glos.html

    生物控制词汇
    http://www.nysaes.cornell.edu/ent/biocontrol/glossary.html
    词汇较少

    3.
    微生物学

    病毒学词汇集
    http://www-micro.msb.le.ac.uk/MBChB/VirGloss.html
    词汇量32

    土壤微生物学词汇
    http://dmsylvia.ifas.ufl.edu/glossary.htm
    该词典词汇量约500,更新时间:19988.25

    4.
    动物学
    中科院昆明动物所做的脊椎动物分布名录数据库(观星人提供),可按中文或拉丁文查询,也可按照分布地区及类别查询。支持模糊查询
    http://www.kiz.ac.cn/datasource/datasource-c/animalinquire.htm

    动物解剖学词汇
    http://www.ii.uj.edu.pl/staff/artur/enc/TOCE.htm

    植物、动物的拉丁语-斯洛文尼亚语-英语词汇
    http://www.agroweb.bf.uni-lj.si/geslovnik.htm
    网速好象有点慢

    北美植物、动物词典
    http://www.enature.com/
    4800种物种,配图片
    欧洲53种语言的动物学词典
    http://www.informatika.bf.uni-lj.si/magus.html#b

    北极圈生物
    http://www.mnh.si.edu/arctic/html/glossary.html

    哺乳动物头骨词汇
    http://www-users.york.ac.uk/~wjh101/hedbone/glossary.htm
    不知道感兴趣的人多不?

    鸟类观察术语
    http://www.birdcare.com/bin/searchdict

    鸟名词典
    http://www.knutas.com/birdsearch/
    将鸟名在15种欧洲语言中互译。值得一提的是,该网站有大量鸟的摄影图片,非常好看。

    鸟类解剖词汇
    http://www.ups.edu/biology/museum/birdglossary.html
    不多

    鸟类名称字典
    http://www.mumm.ac.be/%7Eserge/birds/
    804
    条记录(种和亚种),9种语言:Latin (the scientific name of the species), Dutch, English, French, German, Italian, Spanish, Swedish and Russian

    鸟类词汇
    http://www.npwrc.usgs.gov/resource/literatr/avian/avian.htm

    超过1500种动物的介绍
    http://www.tiscali.co.uk/reference/dictionaries/animals/
    包括大小、生活习性、历史等。

    昆虫学词汇
    http://www.datazg.com

     

     

    英日昆虫学词典
    http://konchudb.agr.agr.kyushu-u.ac.jp/dic/

    似乎是关于昆虫的
    http://www.drdons.net//Dr_Dons_Termite_Glossary.htm

    关于植保的
    http://www.jpkjz.com

     

     

    FDA的软体动物词汇
    http://vm.cfsan.fda.gov/~ear/mollglos.html
    报关时用的

    网络渔业词典----渔猎词霸: http://www.china-fishery.net/fdis/index.asp

    提供中英拉查询海洋生物,同时提供分类信息,相当好!

    海洋生物学词典
    http://oceanography.geol.ucsb.edu/Student_Pages/Paul/glossary.html
    不是很多

    海洋生物学词汇
    http://life.bio.sunysb.edu/marinebio/glossary.html

    海洋学及地球科学(包括海洋生物)
    http://stommel.tamu.edu/~baum/paleo/paleogloss/paleogloss.html

    鱼类术语
    http://fins.actwin.com/glossary.php
    词汇不多

    渔业词汇
    http://www.state.ia.us/dnr/organiza/fwb/fish/educat/glossary.htm

    关于鲸的词典
    http://www.enchantedlearning.com/subjects/whales/glossary/index.shtml
    科普性的,有些小图片,比较有意思。

    珊瑚词典
    http://www.coralrealm.com/viewpage.ihtml?page=/glossary.html

    蓝螃蟹词汇
    http://www.blue-crab.org/glossary.htm
    估计没几个人用的着

    恐龙词典
    http://www.dinodictionary.com/index.asp
    还画出每种恐龙与人比有多大

    http://www.dinosauria.com/dml/diction.htmhttp://www.dinosauria.com/dml/anatomy.htm
    另两个恐龙相关的词典,后者是解剖学的。

    恐龙与古生物学词典
    http://www.enchantedlearning.com/subjects/dinosaurs/glossary/
    配了许多插图,很好看

    关于三叶虫的词汇
    http://www.aloha.net/~smgon/glossary.htm
    对古生物感兴趣的看看

    关于系统发生学的
    http://www.bechly.de/glossary.htm
    不知道理解地对不对

    关于进化树
    http://www.science.uts.edu.au/sasb/glossary.html

    5.
    植物学

    植物学词典 ya_hoo战友曾经推荐) ****
    http://glossary.gardenweb.com/glossary/
    该词典词汇量约4400,包括了植物、园艺、建筑、风景等方面的术语

    中国花卉报的花卉拉丁名、英文名、汉语名词典(观星人提供)
    http://www.china-flower.com/dict/

    植物拉丁名-英文普通名词典
    http://www.comp.leeds.ac.uk/pfaf/D_latin.html

    植物药材索引
    http://www.botanical.com/botanical/mgmh/comindx.html
    该词典由Mrs. M. Grieve1931年出版,包含了药学、烹调学、化妆以及民间药材等方面的术语

    常见植物病
    http://www.apsnet.org/online/common/toc.asp
    可以根据病名检索,可以根据植物名检索

    植病学词汇
    http://arneson.cornell.edu/Glossary/Glossary.htm

    植物命名法中的常见符号
    http://fp.bio.utk.edu/mycology/Nomenclature/nom-conv.htm

    关于植物命名法的
    http://fp.bio.utk.edu/mycology/Nomenclature/nom-onyms.htm

    水生植物词汇
    http://aquat1.ifas.ufl.edu/glossary.html

    食肉植物的名字来源
    http://www.flytrap.demon.co.uk/cpdict.htm

    森林保护词汇
    http://www.metla.fi/metinfo/metsienterveys/info/term-e.htm

    6.
    农学

    美国新墨西哥州立大学农业词汇集
    http://www.cahe.nmsu.edu/news/aggloss.html
    汇集了农业方面的常见的词汇、术语以及新墨西哥州常见的农业害虫。词汇量约300

    7.
    医学
    一个医学词汇网站,非常好.(lxl-yuan提供)
    http://mededucation.bjmu.edu.cn/english%20web%20Medical%20Vocabulary.asp
    包括基础医学基本词汇\汉英基础医学词汇
    \
    基础医学英语词典\临床医学词汇\汉英临床医学词汇\医学词缀\词汇练习
    大学英语四六级词汇等

    英国在线医学词典(On-Line Medical Dictionary) ******
    http://cancerweb.ncl.ac.uk/omd/
    该词典包含生物化学、细胞生物学、化学、医学、分子生物学、物理学、植物学、放射生物学等众多方面的科学技术术语。该词典始于1997年创建,目前词汇量已有46,000,约1835万字,堪称海量。

    在线英汉医学词典 ****
    http://www.esaurus.org/
    该词典也是以在线的形式出现的,包括医学方面的近15000个常用的术语。附加医学图像。

    MERck
    的在线医学词典!http://www.mercksource.com/pp/us/cns/cns_hl_dorlands.jspzQzpgzEzzSzppdocszSzuszSzcommonzSzdorlandszSzdorlandzSzdmd_a-b_00zPzhtm
    很好,连发音都有了!--------------------令狐 提供

    医学词典
    http://www.medical-dictionary.com/

    NDI
    的生物学和医学词汇集
    http://www.ndif.org/t-a.html
    综合了几本词典,不错

    口腔生理学词典
    http://www.eclipse.co.uk/moordent/glossary.htm

    流行病学词典
    http://www.swintons.net/jonathan/Academic/glossary.html

    神经病学词汇(romance2003提供)
    http://www.bioon.net/UpLoadFile/2003-11/200311316234433896.txt

    医学影像学词典
    http://www.amershamhealth.com/medcyclopaedia/medical/index.asp
    amersham
    的,还有很多图片

    8.
    其他
    单位换算词典
    http://www.ex.ac.uk/cimt/dictunit/dictunit.htm

    科学名人名言集
    http://naturalscience.com/dsqhome.html
    挺有意思,如Give me a place to stand, and I will move the Earth. (给我一个支点,我将撬动地球)之类。


    --
    Sincerely yours,
    Chuntao Yuan
    Shanghai Research Center for Model Organisms
    No.3577 Jinke Road,Pudong New District
    Shanghai, China 201203